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在顯微鏡下觀察人體組織,必須將組織切成以微米為單位的薄片,使其透光并易于觀察,但直接切取柔軟組織是難以辦到的。 石蠟包埋法是將“支持物質”-石蠟滲入組織內部,而水與石蠟又是不相混合的,所以在浸蠟和包埋前必須將組織內所含的水分脫去。一般是浸入逐級增加濃度的酒精來完成。
由于酒精和石蠟不能混合,再用或冬青油置換出組織中的酒精,使其透明,然后放入融化的石蠟中。石蠟包埋--將浸蠟的組織塊置于包埋框中,冷卻后組織塊便具有石蠟的硬度,切片機便能將組織切成薄片。切片進行連續切片,厚5μm左右,放入45℃漂烘儀內進行展片。待蠟片展平后進行裱片。將切片放置60c溫箱3~5h,使切片粘貼牢固,待用。但是需要注意的是切片時必須保持切片刀銳利,切片要薄而平整、烤片的溫度不宜過高,高溫烤片對抗原有破壞作用。
病理切片根據具體用途不同,可以分為普通he切片、免1疫組化切片以及免1疫組化用鹽敷切片,主要是根據后續應用來決定其應用的范圍。 根據后續用途不同,病理切片主要分為普通he切片、免1疫組化切片以及免1疫組化用鹽敷切片。 首先,植物切片檢測技術服務,當對組織進行良惡1性的評判以及后續組織學評估時,只需要普通he切片。 其次,如果進行后續組織學判讀,則需要進行免1疫組化、原位雜交等相關的檢測進行后續病理的細分。 同時,對-進行預后判讀時,需要特殊切片即-切片,它主要用于后續免1疫組化技術以及熒光原位雜交技術。
切片經he染色后,要脫水透明,才能用中性樹膠封蓋。he染色對于貼壁生長細胞,胰酶-,調整細胞濃度約1×105/ml,滴加于蓋玻片上(置于6孔板中),培養相應時間后,取出細胞爬片,用pbs 洗滌3次。著況與組織或細胞的種類有關。切片在蘇mu素染液中停留過長;或切片太厚;或分化時間太短。這種情況首先鏡下看看切片厚度(佳厚度1-2層細胞核),要么重新染色,要么重新制片。染色的終結果是:細胞核呈藍色、胞質、肌纖維、膠原纖維和紅細胞呈深淺不一樣的紅色,病理技術服務提醒:在進行he染色需要染色時間,脫水,染色時間不一樣,需要等 ,明確he評判標準。
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