石蠟又稱晶型蠟,通常是白色、無(wú)味的蠟狀固體,在47°c-64°c熔化,密度約0.9g/cm3,溶于氣油、二流化碳、二甲本、乙米、---、綠仿、四綠化碳、石鬧油等一類非極性溶劑,不溶于水和甲春等極性溶劑。純石蠟是-的絕緣體,其電阻率為1013-1017歐姆·米,比除某些塑料尤其是特氟龍外的大多數(shù)材料都要高。石蠟也是-的儲(chǔ)熱材料,其比熱容為2.14–2.9j·g–1·k–1,熔化熱為200–220j·g–1。石蠟的主要性能指標(biāo)是熔點(diǎn)、含油量和---性。
1.取材
確定所取材料的來(lái)源及部位,縱切還是橫切;
取材要迅速,防止阻止發(fā)生進(jìn)一步變化,濰坊輕質(zhì)液狀石蠟,材料體積要適宜。
下圖為植物芽體取樣實(shí)拍。22.固定
1 固定液的選擇
chang用的固定液為faa萬(wàn)用固定液。
它的優(yōu)點(diǎn)是材料固定時(shí)間不受---,固定時(shí)間短則數(shù)小時(shí),長(zhǎng)則數(shù)月或數(shù)年。可做材料保存液
配方: 50%或70%酒精 90ml
冰--- 5 ml
富er馬林 5 ml
(柔軟材料用50%酒精,堅(jiān)硬材料用70%酒精配制)
2材料固定后的處理
沖洗或漂洗:組織固定后應(yīng)充分水洗,除去留在組織內(nèi)的固定液及其結(jié)晶沉淀,否則會(huì)影響以后的染色效果。
(材料固定后,若暫時(shí)不能進(jìn)行下一步操作,可于70%的酒精溶液或直接與faa固定液中,于冰箱中4℃存放。)
下圖為固定液浸泡的組織切塊。33.脫水
目的:水和透明劑不能互溶,只有脫去水分后,才能讓透明劑進(jìn)入。
試劑:梯度酒精溶液
流程:70%---85%---95%--100%--- 100% 每步1h-2h左右。
注意事項(xiàng):-脫水梯度和每一步脫水時(shí)間,水要完全脫凈,但也不能過(guò)度脫水過(guò)久使組織變脆、收縮,這個(gè)時(shí)間大家可以根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)來(lái)摸索一下,不必完全按照本操作來(lái)。
下圖為自動(dòng)組織脫水機(jī),適于大量樣品組織脫水用。如果材料體積及樣品量較少可用小燒杯做容器來(lái)進(jìn)行逐級(jí)脫水。44.透明
目的:純酒精不能與石蠟相溶,還需用能與酒精和石蠟相溶的媒浸液,替換出組織內(nèi)的酒精。
(二甲本是chang用的透明劑,可以-地與石蠟互溶)
流程:二甲本與酒精的等體積混合液1h---純二甲本1h---純二甲本1h。55.浸蠟與包埋
目的:用石蠟取代透明劑,使石蠟浸入組織而起支持作用。
浸蠟程序:(恒溫)
1低溫浸蠟36℃:接上步,在有二甲本和材料的燒杯中逐步加碎蠟至過(guò)飽和石蠟不能溶解,過(guò)夜12-24h。
2高溫浸蠟55-60℃,高于石蠟熔點(diǎn)3℃ :
將上步二甲本與石蠟的混合液倒出,不要倒掉材料,將燒杯中加入純石蠟,共5-24h。純石蠟需要更換三次。
關(guān)于石蠟的選擇石蠟熔點(diǎn):
對(duì)于較硬的材料,用熔點(diǎn)較高的石蠟進(jìn)行包埋;
當(dāng)切片較薄時(shí)在8μm以下,選用熔點(diǎn)較高的石蠟包埋;
夏季宜采用熔點(diǎn)較高的石蠟56,58℃,冬季宜選用熔點(diǎn)較低的石蠟52,54℃。66.切片
傳統(tǒng)的切片方法是將包埋好的蠟塊用刀片修成規(guī)整的梯形,粘于小木塊上,輕質(zhì)液狀石蠟廠家,上機(jī)切片。
新型的切片方法是將包埋框見下圖代替木塊的支撐作用,上機(jī)切片。
切片的厚度可以根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)要求來(lái)確定,一般在8μm-20μm范圍內(nèi)。
下圖為傳統(tǒng)切片機(jī)與新型自動(dòng)切片機(jī)77.粘片與烤片
粘片:用粘片機(jī)將蠟片牢附于載玻片上,防止在后續(xù)的操作中材料脫落。
在載玻片上涂抹粘片機(jī)甲液,再滴蒸餾水乙液,輕質(zhì)液狀石蠟價(jià)格,放上蠟片,用濾紙吸取多余的水分。
烤片:將載玻片放于40℃展片臺(tái)中烤干。
常用的粘片機(jī)為郝伯特(haupt) 配方:
甲液:明膠 1g 乙液:甲醛 4 ml
蒸餾水 100ml 蒸餾水 100ml
甘油 15 ml
本酚 2g88.脫蠟與復(fù)水、染色
脫蠟?zāi)康模焊稍锖蟮那衅杳撓灱皬?fù)水才能在水溶性染液中進(jìn)行染色。
復(fù)水目的:脫蠟后的材料,如果不經(jīng)過(guò)復(fù)水,輕質(zhì)液狀石蠟多少錢,直接進(jìn)入染色劑中,材料將會(huì)---變形,甚至難以染色。
染色目的:使細(xì)胞組織內(nèi)的不同結(jié)構(gòu)呈現(xiàn)不同的顏色和足夠強(qiáng)的差異以便于觀察。
總體流程:二甲本***1/2 二甲本+1/2純酒精***100%酒精***95%酒精***85%酒精***番紅4h以上***95%酒精***固綠迅速***95%酒精迅速***100%酒精***1/2 二甲本+1/2純酒精***二甲本***二甲本,以上各級(jí)約需5~10分鐘,已注明時(shí)間的除外。
染色劑:1%番紅85%酒精配制
0.5%固綠95%酒精配制99.切片脫水、透明和封固
接上步,在載玻片上滴加適量1~2滴中性樹膠,再將潔凈蓋玻片傾斜放下,進(jìn)行封片。
切片放入42℃溫箱中干燥過(guò)夜。鏡檢,將合格的切片貼上標(biāo)簽。
封固劑選擇加拿大樹膠canada balsam或中性樹膠
至此,植物組織的石蠟切片大功告成!
隨著現(xiàn)代科技的逐步發(fā)展,工業(yè)石蠟就是科技發(fā)展的一個(gè)產(chǎn)物,它是在傳統(tǒng)工業(yè)中提煉出來(lái)。它可以用在各行各業(yè),也是我們生活當(dāng)中無(wú)處不在的一個(gè)原料。因?yàn)榇罅康奈锲沸枰檬瘉?lái)制造那,工業(yè)石蠟有什么樣的用途呢?
工業(yè)石蠟是從石油、頁(yè)巖油提煉出來(lái)的一種烴類混合物,主要的成分是固體烷烴,無(wú)臭,是一種白色或者是淡黃色的半透明的固體。工業(yè)石蠟可以用來(lái)制作纖維板、火柴等。用石蠟可以制作溶劑脫蠟或者是蠟膏,還可以用來(lái)制作高ji脂肪酸、火柴、蠟燭、軟膏、電絕緣材料、防水劑等等。石蠟中加入聚烯烴使得熔點(diǎn)增加,柔韌性和粘附性比較高,可以用來(lái)防潮、防水等表面涂層和蠟燭的生產(chǎn)。石蠟還可以制作成蠟紙,還可以加入棉紗里面,同時(shí)工業(yè)石蠟還可以制成分散劑、潤(rùn)滑脂、乳化劑、洗調(diào)劑等等。
所以,工業(yè)石蠟多用來(lái)制作纖維板、火柴、洗調(diào)劑等等物品,還可以做成蠟膏用于防水、防潮等作用。工業(yè)石蠟的用途是相當(dāng)多的。