elisa試劑盒——elisa實(shí)驗(yàn)常見問題及解決方案
背景深,全部呈有色通常的elisa背景值od<0.2
1 洗滌不充分,洗后未拍干,樣品中其它成分殘留或酶標(biāo)記物殘留 洗液準(zhǔn)確配制;充分洗滌,靜置15秒,拍干。加樣或加酶拍板的濾紙應(yīng)棄去不用,不要反復(fù)使用,否則易造成污染。
2 底物污染,未避光保存,出現(xiàn)顏色 棄去底物,玉米赤霉烯酮elisa試劑盒報(bào)價(jià),重新配置
3 樣品稀釋液污染 棄去稀釋液,重新配置
4 吸頭重復(fù)使用,未洗凈或消毒不 吸頭盡可能-使用
5 不正確的孵育時(shí)間,溫度尤其是底物孵育的時(shí)間 常用的溫育溫度有37℃和室溫,其次是43℃和2~8℃。完全按照說明書要求。
6 偶聯(lián)抗體streptavidin-hrp濃度過高 按照說明書調(diào)整到合適的濃度
7 elisa板子不正確的貯存 酶標(biāo)板貯存于2-8 ℃;使用結(jié)合力低點(diǎn)的elisa板
8 沒有正確封閉 在標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液中加入動(dòng)物蛋白或延長封閉時(shí)間
9 樣本溶血- 建議使用非溶血或輕微溶血樣本,-溶血樣本會導(dǎo)致背景偏高。
elisa試劑盒檢測過程中的注意事項(xiàng)
elisa實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則
1、要-移液槍的準(zhǔn)確性,誤差不能超過2%。可用水和電子天平進(jìn)行確定。但要有人員進(jìn)行矯正。2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)。3、要在實(shí)驗(yàn)前1小時(shí)將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復(fù)到室溫,以使結(jié)果更穩(wěn)定。4、實(shí)驗(yàn)時(shí),要使底物避光保存。5、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。6、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。7、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,玉米赤霉烯酮elisa試劑盒價(jià)格,液滴會自然流下去。8、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用儀器的晃動(dòng)功能。
elisa試劑盒有哪些需要注意的?
1. 跟著病況的進(jìn)展或由其他因素影響,玉米赤霉烯酮elisa試劑盒,某些在機(jī)體內(nèi)的含量發(fā)作大幅動(dòng)搖,因此有-對標(biāo)本進(jìn)行預(yù)處理。間接法測定中,標(biāo)本恰當(dāng)稀釋還可下降非特-反響。
2. 加樣一般運(yùn)用加液器,在elisa試劑盒中一般有4次加樣:加標(biāo)本、加酶結(jié)合物、加底物和加間斷液。加標(biāo)本時(shí)有-每份標(biāo)本運(yùn)用一支移液器吸嘴,避免交叉污染。加酶結(jié)合物、底物和間斷液時(shí)則不需更換吸嘴。
3.在成批手藝檢測中,玉米赤霉烯酮elisa試劑盒,還應(yīng)留神操作時(shí)差的影響。加樣及混勻時(shí)間的差異,使抗原反響和酶促反響時(shí)間不一致,對競爭法及定量檢測影響很大,不留神可能會導(dǎo)致過錯(cuò)效果或定量不準(zhǔn)。
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