細(xì)胞名稱(chēng): ---c crl-2956(su-dhl-2)細(xì)胞, su-dhl-2細(xì)胞, 人彌漫性組織淋巴liu細(xì)胞
種屬來(lái)源: 人
組織來(lái)源: 淋巴
特 征: 彌漫性組織淋巴liu
細(xì)胞形態(tài): 淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性: 懸浮生長(zhǎng)
培 養(yǎng) 基: dmem培養(yǎng)基，90%；fbs，10%。
生長(zhǎng)條件: 氣相：空氣，95%；---，5%; 溫度：37 ℃,
傳代方法: 1：2至1：6，每周2次。
凍存條件: 90% 完全培養(yǎng)基+10% dmso，液氮儲(chǔ)存
支原體檢測(cè): 陰性
安全等級(jí): 1
str:
d5s818: 13
d13s317: 11, 12
d7s820: 11, 13
d16s539: 14
vwa: 17
tho1: 6, 9
tpox: 8
csf1po: 12
amelogenin: x
1) 收到細(xì)胞后，請(qǐng)檢查是否漏液 ，如果漏液，請(qǐng)拍照片發(fā)給我們。
2) 請(qǐng)先在顯微鏡下確認(rèn)
3) 棄去t25瓶中的培養(yǎng)基，添加 6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
4) 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%請(qǐng)及 時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代，傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
5) 接到細(xì)胞次日，請(qǐng)檢查細(xì)胞是 否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或---污染，請(qǐng)及時(shí)與我們?nèi)〉寐?lián)系。
1復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1ml 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4ml 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000rpm 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2ml 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2細(xì)胞傳代：如果
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 pbs 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml ---液0.25%trypsin-0.53mm edta于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中--- 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞---情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000rpm 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2ml 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)---時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 t25 瓶為類(lèi)；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，pbs 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止---，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 dmso，輕輕混勻，dmso 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn) 象發(fā)生請(qǐng)及 時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所 需細(xì)胞因子 等，---細(xì)胞培養(yǎng)條件一致。若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn) 題，責(zé)任由客戶(hù)自行承擔(dān)。
3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量 從瓶 壁脫落，將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng) 4~6 小時(shí),再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均 會(huì)貼壁，若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán) 染色測(cè)定細(xì)胞活力，如果證實(shí)細(xì)胞活力正常， 請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無(wú)活 力，請(qǐng)拍下 照片及時(shí)和我們聯(lián)系，信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4. 靜置細(xì)胞貼壁后，請(qǐng)將細(xì)胞瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基倒出，留 6~8ml 維持細(xì)胞正常培養(yǎng)，待細(xì) 胞匯 合度 80%左右時(shí)正常傳代。
5. 請(qǐng)客戶(hù)用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用，細(xì)胞 傳代時(shí)可以 一定比例和客戶(hù)自備的培養(yǎng)基混合，使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
6. 建議客戶(hù)收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和 我司技術(shù) 部 溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐�(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián) 系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們 的------回訪(fǎng)直至問(wèn)題解決。
7.該細(xì)胞僅供科研使用。
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