南京三豐機械有限公司為您提供人可溶程序性死亡因子spd-1elisa試劑盒。人可溶程序性死亡因子spd-1elisa試劑盒操作步驟
1使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入 大量的氣泡,產生加樣上的誤差。
2根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔 建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。標本用 標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內。
3加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加 入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
4甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重 復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
5每孔加入80ul的親和鏈酶素-hrp,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
6甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重 復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
7每孔加入底物a、b各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
8取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。
9在450nm波長處測定各孔的od值。
【注意事項】
1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開 封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果 。
3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣 時間zui好控制在5分鐘內,如標本數量多,使用排槍加樣。
4.請每次測定的同時做標準曲線,zui好做復孔。如標本中待測物質含量過高樣 本od值大于標準品孔---孔的od值,請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數n倍后 再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數×n×5。
5.封板膜只限---使用,以避免交叉污染。
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