生物素-酪胺信號放大試劑盒hrp底物 酪胺信號放大技術tsa, tyramide signal amplification主要原理是,在---0---存在情況下,標記在抗0體上的hrp將底物酪胺活化,后者與相鄰的蛋白上的酪氨酸殘基生成穩定的共價結合,因此這些蛋白如hrp、抗0體上會富集大量帶有生物素標記的酪胺,使信號被有效放大。生物素為小分子化合物,分子量244。親和素與生物素有---的親和力,結合牢固,而且特---高,每個親和素可結合4個生物素。用小分子生物素與hrp酶標記的親和素發生特---反應,可減小抗原抗0體反應的空間位阻,使反應明顯放大。
通用步驟
加血0清封閉液
1. 去掉片子上多余緩沖液。
2. 取適量血0清封閉液完全覆蓋切片。
3. 在濕盒中室溫孵育 15min。
4. 浸入洗滌緩沖液中 5min。
加一抗
1. 去掉切片上的多余洗滌緩沖液。
2. 將稀釋的一抗加到切片上,完全覆蓋組織細胞。
3. 在濕盒中室溫孵育 30min。
4. 用洗滌緩沖液洗去一抗,在洗液中潤洗 5min。
注:如果顯色速度過快,建議進一步稀釋一抗,將一抗稀釋度以 1/50、1/100、1/200、1/400 和 1/800,生物素標記試劑盒,zui佳稀釋度的選擇是顯色 10min 后陽性顯色效果滿意而沒有背景顯色。
運輸、儲存和有效期
常溫運輸,室溫避光保存,有效期 12 個月。
操作方法
蘇0木0精染液細胞學染色步驟:
1. 脫蠟,水化。
2. 將組織片浸入蘇0木0精染液 1~2 分鐘。
3. 換兩次蒸餾水,每次浸入 10~20 次。
4. 藍化:0.5~1%---,30 秒~1 分鐘,涂片應該變藍色。
5. 換兩次蒸餾水,每次浸入 10~20 次。
6. 1%伊紅水溶液 5~10 分鐘
7. 蒸餾水快洗
8. 換三次 95%---,每次浸入 10~20 次。
9. 換兩次無水---,每次浸入 10~20 次。
10. 換三次二甲0---,每次浸入 10~20 次。
11. 封片。
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