預制梯度等密度離心法。要求在離心前預先配制管底濃而管頂稀的密度梯度介質,常用介質有蔗糖、cscl、cs2so4等,待分離樣品一般鋪在梯度液頂上,如需挾在梯度液中間或管底部,則需調節樣品液密度。離心后,不同密度的樣品顆粒到達與自身密度相等的梯度層,即達到等密度的位置而獲得分離。
自成梯度等密度離心法。某些密度介質經過離心后會自成梯度,離心管規格,例percoll,可迅速形成梯度,cscl、cs2so4和三碘------胺經長時間離心后也可產生穩定的梯度。需要離心分離的樣品可和梯度介質先均勻混合,離心開始后,阜陽離心管,梯度介質由于離心力的作用逐漸形成管底濃而管頂稀的密度梯度,與此同時,可以帶動原來混合的樣品顆粒也發生重新分布,到達與其自身密度相等的梯度層里,即達到等密度的位置而獲得分離。
離心力也可以用rcf相對離心力來定量。rcf通常表現為地球重力加速度的倍數。
rcf的計算公式是轉頭半徑乘以角速度平方,然后除以地球的重力加速度。
rcf通過下面的公式和rpm相關,其中r代表離心機的半徑,以厘米為單位。
對該公式的使用可能會影響到實驗的成功或失敗,但您不必在每個新的操作中都采用這種計算方法。離心機通常都附帶了圖表來幫助簡單地換算rcf和rpm。用一個尺子連接離心機的半徑和一個已知的rpm數值,就可以得到rcf數值。
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