無(wú)細(xì)胞系統(tǒng)是利用細(xì)胞提取物而不是細(xì)胞進(jìn)行基因轉(zhuǎn)錄和翻譯的系統(tǒng)。一個(gè)無(wú)細(xì)胞基因表達(dá)系統(tǒng)主要包括三個(gè)部分:細(xì)胞提取物,反應(yīng)混合液,以及---模板
1.細(xì)胞提取物:從細(xì)胞中提取的物質(zhì),主要包含核糖體、rna聚合酶、其他轉(zhuǎn)錄和翻譯蛋白比如σ因子、起始因子和延伸因子,以及用于能量代謝的酶和輔因子。在有些菌株的提取物中,可能抑制了蛋白酶和---酶的活性。
2.反應(yīng)混合液:包含蛋白質(zhì)合成所需的一些原料,如---酸、核苷酸、鹽離子如銨鹽、鎂、鉀、能源糖類、磷酸肌酸等、擁擠試劑crowding agents、代謝輔因子輔酶a、nad、緩沖液、trna以及其他代謝添加劑等。
3.---模板:可以是質(zhì)粒dna或pcr產(chǎn)物線裝dna,濃度通常在1-20 nm。
無(wú)細(xì)胞系統(tǒng)一般的反應(yīng)體積為10微升,但是根據(jù)其實(shí)際應(yīng)用,反應(yīng)體系可以從10(-15)到103變化。在開(kāi)始反應(yīng)時(shí),將三種組分在16-37℃下孵育,蛋白質(zhì)合成將在1-24h內(nèi)進(jìn)行。
男性缺失蛋白質(zhì)比女性缺失蛋白質(zhì)更需要重視,男士一旦缺失蛋白質(zhì),會(huì)導(dǎo)致男性下降,wb增強(qiáng)劑,活力降低以及不液化造成男性。α---酸的結(jié)構(gòu)通式蛋白質(zhì)是一種復(fù)雜的有機(jī)化合物,舊稱“朊ruǎn)”。---酸是組成蛋白質(zhì)的基本單位,---酸通過(guò)脫水縮合連成肽鏈。蛋白質(zhì)是由一條或多條多肽鏈組成的生物大分子,每一條多肽鏈有二十至數(shù)百個(gè)---酸殘基-r不等;各種---酸殘基按一定的順序排列。蛋白質(zhì)的---酸序列是由對(duì)應(yīng)基因所編碼。除了遺傳密碼所編碼的20種基本---酸,在蛋白質(zhì)中,某些---酸殘基還可以被翻譯后修飾而發(fā)生化學(xué)結(jié)構(gòu)的變化,從而對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行或調(diào)控。